直接鏡檢法由于各類細菌培養(yǎng)基分析顯微鏡
采用目鏡計數(shù)網(wǎng)計算
此法一般不必把水樣稀釋,只將一定量的水樣涂開,染色放在油鏡下
直接觀察,若采用染色法可區(qū)別死活孢子,可計數(shù)活孢子,比應(yīng)用平板培
養(yǎng)法計數(shù)活孢子來得快捷,在實用上有一定價值。操作步驟如下:
(1)用蠟筆在4片載玻片中段劃邊長為2或厘米的止方形,即面積為4或1
平方厘米。
(2)分別用4支無菌移液管吸四種水樣各0.01毫升置于玻片正方形中,
涂滿整個正方形面積然后按單染色法,用石炭酸復紅染色劑或草酸銨緒
晶紫染色
(3)將染色片放于油鏡下觀察:計算出目鏡計數(shù)網(wǎng)中每小格的平均菌落
。用測微尺標定目鏡計數(shù)網(wǎng)格在視野中的邊長。
超濾膜直接鏡檢法由于各類細菌不能在一種培養(yǎng)基上長出,上述所
計算的,雖然是活菌,但所計算的菌數(shù)可能偏少。超濾膜直接鏡檢法可
用來計算水樣中的各種細菌的總數(shù)。可是包括了死細菌,故其數(shù)量可能
偏高,操作方法如下:
(1)濾膜處理,超濾器的安裝,抽濾方法同上法
(2)用無菌移液管吸5.0―10.0毫升水樣,注入直徑為10毫米的小濾器(
能濾過細菌),加3-5倍量的無菌水稀釋,使菌體分散均勻,然后將過濾的
稀釋水樣放于超濾器抽濾濃縮,若水樣是海水,須加少量無菌蒸餾水,再
抽濾除去膜上的鹽分
(3)用石炭酸藻紅或呂弗氏美藍,按前法將濾膜染色,可區(qū)別濾膜上的
菌體與無機顆粒,后者染色較深,而菌體清晰。
