食品微生物學(xué)小型化檢測(cè)分析光學(xué)顯微鏡
小型化檢測(cè)儀器和檢測(cè)工具的發(fā)展
在食品微生物學(xué)中,對(duì)正常菌群、腐敗組織、食源性病原菌、發(fā)酵
劑等進(jìn)行的微生物學(xué)檢測(cè)鑒定是應(yīng)用微生物學(xué)的重要組成部分。傳統(tǒng)
檢測(cè)方法有一百多年的歷史,即采用大量培養(yǎng)基(10m或是更多)來研究
細(xì)菌的某一特性(例如,采用乳糖肉湯來培養(yǎng)大腸桿菌并進(jìn)行乳糖發(fā)酵
實(shí)驗(yàn))。將待測(cè)微生物接種到試管中很麻煩,因?yàn)橐淮沃荒芙庸堋：芏?BR>微生物學(xué)家設(shè)計(jì)了合適的容器和更小的試管來進(jìn)行這些實(shí)驗(yàn),以減少培
養(yǎng)基的使用量。該作者系統(tǒng)地開發(fā)了許多適用于微孔板的簡(jiǎn)化方法來
減少試劑和培養(yǎng)基的使用量(從5~10mL減少到約0.2m),該微孔板有96個(gè)
孔,按8×12的格局排列。該系統(tǒng)的基本組件包括經(jīng)過商業(yè)滅菌的微孔
板(用來盛放待測(cè)培養(yǎng)物)、批量接種設(shè)備、用來盛放固體培養(yǎng)基的容
器(大 Petri盤),以及液體培養(yǎng)基(盛放于另一種微孔板中,每孔可裝0.
2mL液體培養(yǎng)基)。
把待測(cè)液體培養(yǎng)物(純培養(yǎng)物)導(dǎo)入無菌微孔板的孔中以制成樣板(
每孔0.2m)。微孔板最多可容納96個(gè)不同的培養(yǎng)物,或48對(duì)相同培養(yǎng)物
或期望的多種組合。采用無菌多頭接種器(從同一板上伸出的96個(gè)吸頭
)將這些培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到固體或液體培養(yǎng)基中。接種器采用酒精火焰滅菌
,每一次轉(zhuǎn)移相當(dāng)于傳統(tǒng)方祛的96次獨(dú)立接種。經(jīng)合適的溫度培養(yǎng)后,
固體或液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)物的生長(zhǎng)情況能被觀察并記錄下來,對(duì)所得數(shù)
據(jù)可以進(jìn)行分析。這些方法適合于研究大量的獨(dú)立菌落,或?qū)Υ郎y(cè)樣品
中大量微生物進(jìn)行研究。該作者采用此小型化系統(tǒng)從肉類和其他食品
中鑒定出數(shù)以千計(jì)的細(xì)菌,研究了有機(jī)染料對(duì)酵母和細(xì)菌的影響,對(duì)多
種組分中的微生物進(jìn)行了具有挑戰(zhàn)性的研究并取得了很好的結(jié)果。這
些系統(tǒng)中的大多數(shù)最初用于腸道菌檢測(cè)(如沙門菌屬、志賀菌屬、變形
桿菌屬、腸桿菌屬等)。后來,許多公司擴(kuò)大了檢測(cè)系統(tǒng)的檢測(cè)范圍,以
便鑒定非發(fā)酵菌、厭氧菌、革蘭陽性菌,甚至酵母和霉菌。起初,需要
一名分析人員來讀出每個(gè)小孔中反應(yīng)的顏色,然后對(duì)照人為制定的編碼
來識(shí)別微生物。
在許多實(shí)驗(yàn)室,自動(dòng)稀釋儀已廣泛地應(yīng)用于快速、準(zhǔn)確的樣品稀釋,
液體轉(zhuǎn)移到微孔板已實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化;②普遍使用的微管自動(dòng)讀數(shù)器能有效
地讀出微管中液體的混濁度、顏色以及熒光性來計(jì)算MPN值;③一流的
數(shù)學(xué)模型,計(jì)算機(jī)解析和結(jié)果打印輸
